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中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門(mén)氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門(mén)氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

用51Cr鉻酸鈉標(biāo)記靶細(xì)胞

時(shí)間:2016/11/7閱讀:1191
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一、用51Cr鉻酸鈉標(biāo)記靶細(xì)胞 
短期標(biāo)記法 
1.用RPMI-1640培養(yǎng)液洗滌107靶細(xì)胞,去上清液。用0.5ml不含的*培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞。加入100μCi(3.7MBq)51Cr鉻酸鈉,37℃水浴中標(biāo)記1小時(shí),每5~10分鐘搖晃一次,混勻細(xì)胞。 
2.如上用RPMI-1640培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞3次,每次400×g 10分鐘。用50ml RPMI-1640培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,置37℃水浴30分鐘,以減少非特異的自然釋放。 
3.離心200×g 10分鐘,去上清液。小心用RPMI-1640培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,盡量減少振蕩引起的細(xì)胞損傷以降低靶細(xì)胞的自然釋放率,將細(xì)胞濃度調(diào)整為0.5×105或1×105/ml備用。 

二、4小時(shí)51Cr釋放實(shí)驗(yàn) 
1.在96孔圓底細(xì)胞培養(yǎng)板中加入51Cr標(biāo)記的靶細(xì)胞,每孔加100μl。 
2.向各孔加100μl效應(yīng)細(xì)胞,效應(yīng)細(xì)胞與靶細(xì)胞的比例(效靶比,E:T)根據(jù)要求而定,通常為5:1~20:1。陰性對(duì)照孔(自然釋放)不加效應(yīng)細(xì)胞只加100μl*培養(yǎng)液,陽(yáng)性對(duì)照孔(zui大釋放)中加100μ1%NP40(或2%SDS,1mol/L鹽酸)。每個(gè)實(shí)驗(yàn)置三個(gè)復(fù)孔。 
3.稍稍離心(100×g 3分鐘)后,置37℃ 5% CO2的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4小時(shí)。 
4.離心培養(yǎng)板200×g 10分鐘,每孔吸出100μl上清液置一次性使用的檢測(cè)管中,在γ-計(jì)數(shù)儀上(或液閃計(jì)數(shù)儀上)測(cè)定上清液中的每分鐘放射性活性(cpm值)。 

3)特異性殺傷活性的計(jì)算 
1.用細(xì)胞毒性百分比表示:細(xì)胞毒性(%)=

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