細胞凝集反應

時間：2017/5/9閱讀：812

細胞質(zhì)膜是由蛋白質(zhì)不同程度鑲嵌在脂雙層中所形成的動態(tài)流動結(jié)構(gòu)，蛋白質(zhì)和脂類分子又與寡糖鏈結(jié)合為糖蛋白和糖脂分子，糖蛋白和糖脂分子伸至細胞表面的分枝狀寡糖鏈在質(zhì)膜表面形成細胞外被(又稱為糖萼)。許多研究結(jié)果表明：細胞間的分子識別、細胞的生長和分化、免疫反應和腫瘤發(fā)生等均與細胞外被(分枝狀寡糖鏈)有關(guān)。凝集素能與細胞外被的糖分子相連接、在細胞間形成“橋”，從而達到細胞凝集的效果。

實驗目的

1、觀察血細胞的凝集現(xiàn)象;

2、掌握凝集素促使細胞凝集的原理。

實驗原理

凝集素(1ectin)是一類含糖的(少數(shù)凝集素例外)并能與糖進行專一性結(jié)合的蛋白質(zhì)，它具有凝集細胞和刺激細胞分裂的作用。凝集素促使細胞凝集主要是由于它能與細胞外被的糖分子相連接、在細胞間形成“橋”的結(jié)果，且加入與凝集素互補的糖分子可以抑制細胞間的凝集反應。

實驗用品

一、器材

顯微鏡、托盤天平、載玻片若干、滴管2支、離心管2支。

二、試劑

pbs緩沖液：稱取NaCl 7.2g、NazHP04 1.48g、KH2P04 0.43g、加蒸餾水，定容至l000 mL，調(diào)pH值到7.2。

三、實驗材料

1.土豆塊莖。

2.2%的紅細胞

以無菌方法抽取兔子靜脈血液(加抗凝劑)，用生理鹽水洗5次，每次2000 r/min，離心5 min，zui后按沉淀壓積的紅細胞體積用生理鹽水配成2%紅細胞懸液

實驗方法

稱取土豆去皮塊莖2g

↓

加10 mL PBS緩沖液，浸泡2h(浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素)

↓

載玻片上滴一滴土豆凝集素

↓

再滴一滴2%紅細胞液

↓充分混勻

靜置20 min

↓

低倍顯微鏡下觀察血球凝集現(xiàn)象

↓

以PBS液加2%血細胞懸液作為對照實驗

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細胞凝集反應

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