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上海士鋒生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 維生素檢測(cè)培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測(cè)培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無(wú)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測(cè)培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測(cè)培養(yǎng)基 化妝品檢測(cè)培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測(cè)培養(yǎng)基 支原體檢測(cè)培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測(cè)培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測(cè)培養(yǎng)基 弧菌檢測(cè)培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測(cè)培養(yǎng)基 檢測(cè)培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測(cè)培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測(cè),增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

DNA序列分析(Sanger酶法)

時(shí)間:2017/7/10閱讀:1170
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一、試劑 
1 、 10 × TBE ( pH 8.3 ): 
2 、 46% 尿素溶液: 
3 、 20% 聚丙烯酰胺溶液 
4 、 10% 過(guò)硫酸胺 
5 、引物 
6 、模板 
7 、 DNA 聚合酶 
8 、放射性標(biāo)記的 dNTP 和 ddNTP 貯存液 
9、TEMED 
二、操作方法 
(一)由雙鏈質(zhì)粒制備單鏈DNA膜板 
取質(zhì)粒 DNA (溶于雙離蒸去離子水中) 8μl ( 1.5 ~ 2ug ) 
↓ 
加 2mol NaOH 2ul ,混勻后稍加離心,置室溫 10min 
↓ 
加 3mol 乙酸鈉( pH5.2 ) 3μl 
雙蒸去離子水 7μl 
無(wú)水乙醇 60μl 
↓ 
置液氮 10min ,離心 10min ( 13krpm ), 
↓ 
加 70%乙醇洗1次,離心 ( 13krpm ) 
↓ 
棄上清,真空抽干,溶于 10ul雙 蒸去離子水中 
↓ 
取樣,電泳鑒定 
(二)聚丙烯酰胺/尿素膠制備: 
將玻板洗凈,拭干; 70% 乙醇洗,涼干;內(nèi)層涂硅油, 
重蒸水洗凈,吹干 
↓ 
混合: 20% 聚丙烯酰胺液 20ml 
10 × TBE 5ml 
46%尿素 25ml 
總計(jì)40ml過(guò)濾紙濾過(guò) 
↓ 
加 10%過(guò)硫酸胺(AP)250μl;用雙蒸去離子水定容至100ml,混勻 
↓ 
倒膠前加入 TEMED 50μl,混勻 
↓ 
灌膠,待凝膠聚合后,將測(cè)序膠板安裝于測(cè)序電泳槽中 
↓ 
電泳槽中加入 800ml1 × TBE 
↓ 
預(yù)電泳

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