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南京森貝伽生物科技有限公司

丙二醛（MDA）測試盒說明書

時間：2012-12-4閱讀：3758
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南京森貝伽生物科技有限公司
 
 
丙二醛（MDA）測試盒說明書
 
（貨號：SBJ003-1） 一、實(shí)驗(yàn)儀器：
玻璃試管或EP管（10ml,本所有售）、微量移液器，可見分光光度計(jì)（532nm）、沸水浴箱（95
℃左右）、旋渦混勻器、離心機(jī) 二、適用范圍：
本試劑盒可測血清、血漿、乳汁等細(xì)胞外液；腫瘤細(xì)胞、紅細(xì)胞、白細(xì)胞、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及各 種動植物組織等樣本中MDA的含量
三、測定意義： 機(jī)體通過酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基，后者能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸引發(fā)脂質(zhì)過氧
化作用，并由此形成脂質(zhì)過氧化物，使組織細(xì)胞受損傷。 四、操作表：
 
 
標(biāo)準(zhǔn)管
空白管
測定管
對照管
10nmol/ml標(biāo)準(zhǔn)品（ml）
a*
 
 
 
無水乙醇（ml）
 
a*
 
 
測試樣品（ml）
 
 
a*
a*
試劑一（ml）
a*
a*
a*
a*
混勻（搖動幾下試管架）
 
試劑二（ml）
3
3
3
3
試劑三（ml）
1
1
1
 
50%冰醋酸（ml）
 
 
 
1
旋渦混勻器混勻，試管口用保鮮薄膜扎緊，用針頭刺一小孔，95℃沸水浴40分鐘，取出后
流水冷卻，然后3500～4000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，（3000轉(zhuǎn)/分以下離心時間需延長，目的使沉 淀*）。取上清，532nm處，1cm光徑，蒸餾水調(diào)零，測各管吸光度值。
a*  表示所取的樣品量、標(biāo)準(zhǔn)品量、無水乙醇的量、試劑一的量，四者均相等。
五、計(jì)算公式：
 
1、血清（漿）等液體樣本中MDA含量計(jì)算公式：
血清（漿）中MDA      測定OD值−對照OD值 標(biāo)準(zhǔn)品濃度樣本測試前
=                                          ×                         ×


含量（nmol/ml）
2、組織中MDA含量計(jì)算公式：

標(biāo)準(zhǔn)OD值−空白OD值（10nmol/ml）

稀釋倍數(shù)


組織中MDA含量 測定OD值−對照OD值 標(biāo)準(zhǔn)品濃度待測樣本蛋白濃度
=                                         ×                         ÷


（nmol/mgprot）


標(biāo)準(zhǔn)OD值−空白OD值（10nmol/ml）    （mgprot/ml）

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