南京森貝伽生物科技有限公司專業(yè)供應(yīng)人elisa試劑盒，大鼠elisa試劑盒，兔elisa試劑盒，植物elisa試劑盒，小鼠elisa試劑盒等各種屬，可檢測樣本包括：血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

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石蠟切片免疫組化染色實驗步驟：

1．石蠟切片脫蠟至水：（石蠟切片染色前應(yīng)置 60℃ 1 小時）。

2．過氧化氫封閉內(nèi)源性過氧化物酶：3%H2O2，室溫 10 分鐘（避光）。

3．蒸餾水洗：5 分鐘，2 次（置于搖床）。

4．抗原修復(fù)：根據(jù)待檢測的抗原，選擇適當?shù)姆椒ā?/span>

5．PBS：5 分鐘，2 次（置于搖床）。

6．正常血清封閉：從染片缸中取出切片，擦凈切片背面水分及切片正面組織 周圍的水分（保持組織呈濕潤狀態(tài)）,滴加正常山羊或兔血清（與第二抗 體

同源動物血清）處理，37℃，15 分鐘。 附：正常血清配制 （或按試劑盒規(guī)定的濃度配制）

按 1:20 比例,用 PBS 配制,每張切片需要量按 50?l+5 ?l （10%拋灑量）計 算 。

7．滴加*抗體：用濾紙吸去血清，不洗，直接滴加*抗體，37℃ 2 小時

8．PBS：5 分鐘，2 次（置于搖床）。

9．滴加*化的二抗，37℃，40 分鐘。

10．PBS：5 分鐘，2 次（置于搖床）。

11．滴加三抗 （SAB 復(fù)合物），37℃，40 分鐘。

12．PBS：5 分鐘，2 次（置于搖床）。

13．DAB  顯色，鏡下觀察，適時終止（自來水沖終止）。 附：DAB 的配制

14．自來水（細水）充分沖洗。

15．蘇木素復(fù)染，室溫，30 秒，自來水沖洗。

16．自來水沖洗返藍，15 分鐘。

17．梯度酒精脫水：80%，2 分鐘 ? 95%，2 分鐘 ? 100%，2 次，5 分鐘。

18．二甲苯透明：I，II（二甲苯）各 5 分鐘

19．封片：加拿大樹膠（或中性樹膠）封片。