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PC-2(腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞)

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更新時(shí)間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):770次

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PC-2(腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞)  培養(yǎng)細(xì)胞注意事項(xiàng):

實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無菌室及無菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)0分鐘后,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái),以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)PC-2(腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞)無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置,其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。

小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

工作人員應(yīng)注意自身之安全,須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于來自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作,并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)之無菌操作臺(tái)(至少ClassⅡ)。操作過程中,應(yīng)避免引起aerosol之產(chǎn)生,小心毒性藥品,例如DMSOTPA等,并避免尖銳針頭之傷害等。

定期檢測(cè)下列項(xiàng)目:5.CO2鋼瓶之CO2壓力5.2CO2培養(yǎng)箱之CO2濃度、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水,每周更換)。5.3.無菌操作臺(tái)內(nèi)之airflow壓力,定期更換紫外線燈管及HEPA過濾膜,預(yù)濾網(wǎng)(300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng),3000小時(shí)/HEPA)。6.水槽可添加消毒劑(Zephrin:750),定期更換水槽的水

 粉末培養(yǎng)基配制好后(加了血清),一般在4度盡量不要超過個(gè)月,如在-20度存放時(shí)間可長(zhǎng)一些,但也不要超過3-4個(gè)月,可能對(duì)于永生化細(xì)胞株來說要求不是太高,細(xì)胞嬌弱,放置時(shí)間不宜過長(zhǎng)。

 開紫外線照射臺(tái)的時(shí)候,就將培養(yǎng)基、酶、DHANKS液那到室外讓它自然升溫。這樣40分鐘后,溫度也升上來了。有很多人將他放到37度水浴鍋里加熱。一定要注意水浴鍋的衛(wèi)生,有的常年不清洗,里面很臟,容易在外面瓶身上吸附大量細(xì)菌。因此用它的也一定要勤換水。從水浴鍋拿出后,找個(gè)毛巾擦干上面的水。

細(xì)胞 停滯期Stagnate phase) 細(xì)胞數(shù)量達(dá)到飽和密度后,如不及時(shí)進(jìn)行傳代,細(xì)胞就會(huì)停止增殖,進(jìn)入停止期。此時(shí)細(xì)胞數(shù)持平,故也稱平臺(tái)期(Plateau phase)。停滯期細(xì)胞雖不增殖,但仍有代謝活動(dòng)。如不進(jìn)行分離傳代,細(xì)胞會(huì)因培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)耗盡、代謝產(chǎn)物積聚、pH 下降等因素中毒,出現(xiàn)形態(tài)改變,貼壁細(xì)胞會(huì)脫落,嚴(yán)重的會(huì)發(fā)生死亡,因此,應(yīng)及時(shí)傳代。
公司更多產(chǎn)品信息
BLB培養(yǎng)基 50 用于雙歧桿菌的分離培養(yǎng)
BLB Medium
PEA 瓊脂 50g 用于從含革蘭氏陰性菌的標(biāo)本中分離培養(yǎng)革蘭氏陽性菌
PEA Agar
乙基紫疊氮鈉肉湯 50 用于腸道菌的選擇性增菌培養(yǎng)(Alpha Biosciences方法)
Ethyl Violet Aziode Broth
艾格瓊脂 50 用于過程中無菌監(jiān)測(cè)(Acumedia方法)
Eugonic Agar
NTM 培養(yǎng)基 50 用于淋球菌的分離培養(yǎng)(Quelab方法)
NTM Medium
TM培養(yǎng)基 50 用于淋球菌的分離培養(yǎng)(Quelab方法)
Thayer Martin Agar
YNB 培養(yǎng)基 00 用于基因工程中酵母菌的發(fā)酵培養(yǎng)
YNB Medium
原材料系列
胰蛋白胨 50 培養(yǎng)基原材料,提供細(xì)菌生長(zhǎng)氮源,含
Tryptone
酪蛋白胨 50 干酪素水解而成,培養(yǎng)基原材料
Peptone from Casein
牛肉浸粉 50 培養(yǎng)基原材料,提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的生長(zhǎng)因子
Beef Extract Powder

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