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植物全磷含量檢測試劑盒資料下載

2017年08月15日 09:41:54人氣:1219來源:齊一生物科技(上海)有限公司

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【資料簡介】

植物全磷含量檢測試劑盒資料下載

注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

磷的存在形態(tài)包括無機磷與有機磷。無機磷主要指磷酸根,參與生物體內多種代謝,包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質磷酸化和脫磷酸化等。通過測定總磷與無機磷含量即可了解作物對磷的利用率,進而為合理施肥提供依據。

測定原理:

植株樣品用硫酸-過氧化氫消化,使各種形態(tài)磷轉變成正磷酸鹽,正磷酸鹽與鉬銻抗顯色劑反應,生產磷鉬藍,藍色溶液的吸光度與含磷量呈正比例關系,用酶標儀測定。

植物全磷含量檢測試劑盒資料下載自備儀器和用品:

石墨消解儀、離心機、水浴鍋、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿 /96 孔板、蒸餾水和濃硫酸。

試劑組成和配置:

試劑一:液體 50ml 
試劑二:液體 5ml
試劑三:粉劑×1 支,4℃避光保存。臨用前加 0.2mL 蒸餾水溶解。
試劑四:液體 0.4mL×1 支,4℃保存。
工作液:臨用前將試劑三和試劑四混合,加 19.4mL 蒸餾水混勻。(提供 20mL 棕色空瓶)

樣本消化:

1.將植物樣本 80℃烘干至恒重后粉碎,過 40 目篩,稱取約 0.3g,加入消化管中,同時取空消化管兩支,用移液管分別往每管中加入 10mL 濃硫酸,輕輕晃動消化管。

2.將 20 支消化管全部置于石墨消解儀上,蓋好蓋子,打開廢氣回收系統(tǒng)以及石墨消解儀,溫度設置為:曲線加熱 100℃,10min;280℃,10min;400℃,40min。

3.將消化管冷卻至室溫,切勿在樣品冷卻之前開蓋。每支消化管中緩慢加入 1mL 試劑二,搖勻,重新放置在石墨消解儀上,溫度設置為:曲線加熱 200℃,10min;320℃,10min;

400℃,30min。

4. 取出消化管冷卻至室溫,切勿在樣品冷卻之前開蓋。每支消化管中緩慢加入 0.5mL 試劑

二,搖勻,重新放置在石墨消解儀上,溫度設置為:曲線加熱 200℃,10min;320℃,10min
400℃,30min。若樣本未呈現澄清狀態(tài),應重復步驟 4 至澄清,即消解*。

5.關閉石墨消解儀,待樣品冷卻后關掉廢氣回收系統(tǒng)。

6.取 2mLEP 管,每個加 900uL 蒸餾水,再加 100uL 消解液混勻后,再加試劑一 500uL,混勻后待測。

植物全磷含量檢測試劑盒資料下載測定操作表

    空白管    測定管
        
樣本(μL)        20
提取液(μL)    20    
工作液(μL)    180    180

充分混勻,25℃靜置 30min

于微量石英比色皿/96 孔板,蒸餾水調零,測定 700nm 處吸光值 A,分別記為 A 空白管和 A 測定管,△A=A 測定管-A 空白管

注意:空白管只需測定一次。計算公式

a.    用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線:y = 0.2936x +0.0012,R2 = 0.9989
全磷含量(g/kg)=(△A-0.0012)÷ 0.2936×V 總×V 樣÷V 反總÷W×10-3×31
= 1.056×(△A-0.0012)÷W

V 反總:反應總體積,0.2mL;V 樣:反應體系中加入樣本體積,0.02mL;V 總:加入提取液體積,100mL,W:樣本質量,g b. 用 96 孔板測定的計算公式如下

標準曲線:y = 0.1468x +0.0012,R2 = 0.9989
全磷含量(g/kg)=(△A-0.0012)÷ 0.1468×V 總×V 樣÷V 反總÷W×10-3×31
= 2.112×(△A-0.0012)÷W

V 反總:反應總體積,0.2mL;V 樣:反應體系中加入樣本體積,0.02mL;V 總:加入提取液體積,100mL,W:樣本質量,g
注意事項

1.配好的試劑 3 天內使用完。

2.zui低檢出限為 0.25mg/Kg。

齊一生物科技(上海)有限公司作者

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