淺談實驗室細菌菌種的保存

【資料簡介】

1 斜面低溫保存法

將分純的待存菌接種于適宜的固體斜面培養(yǎng)基上，得到充分生長后，用封口膜封口，貼上標簽，保存于4℃的冰箱中。此法操作簡單、使用方便、不需要特殊設備，是實驗室菌種保存zui常用的方法。但保存時間短，一般每個月都要移種1次，而且菌種容易變異，所以此方法只適合實驗室短期實驗菌株的保存。

2 半固體瓊脂法

用接種針將以分純的待存菌，穿刺接種于半固體中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)后取出，封上無菌的液體石蠟，貼上標簽，放4℃冰箱保存。此方法簡便易操作，不需特殊設備、技術難度不大，但保存的時間不長，一般只能保存1年以內，而且對抵抗力弱以及一些特殊菌種大概只能存活3～6個月，需要頻繁的傳代，這樣很容易使菌株受到污染、變異。所以此方法不適用菌種的長期保存，只適合實驗室一些要求不高的菌種的短期保存。

3 液體石蠟保存法

將液體石蠟滅菌，放于37℃恒溫箱中，使水汽蒸發(fā)掉備用。再將已分純的待存菌在zui適宜的斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使得到健壯的菌體，用無菌吸管吸取已滅菌的液體石蠟，注入已長好的斜面培養(yǎng)基上，用量以高出斜面1cm為準，將試管直立，貼上標簽，置4℃下保存。此法制作簡單，不需要特殊設備，菌種可以保存1年左右不需要經(jīng)常移種，缺點是保存的時候需要直立放置。此方法適合實驗室短期菌株的保存，而且保存時需要一定的空間［1］。

4 高層半固體瓊脂石蠟保存法

將待存菌經(jīng)平板劃線分離后，挑單個菌落用接種針反復穿刺接種到高層半固體瓊脂培養(yǎng)基中，經(jīng)培養(yǎng)箱培養(yǎng)后取出，用滅菌過的液體石蠟滴加到半固體瓊脂菌種管表層約0.5cm高度，貼上標簽，存放4℃冰箱。此法操作簡便，不需要特殊設備，效果好，可以保存菌株1～2年。所以適合實驗室菌株的較長期的保存［2］。

5 紙片法

將已分純的待存菌用無菌鑷子鑷取紙片，在紙片上刮取4～5個菌落，放入凍存管內，蓋上蓋子后用封口膠布封住邊緣，貼上標簽，放入冰箱冷凍保存（－20℃左右）。此方法具有操作簡單、不需特殊設備、經(jīng)濟實用、保存空間小等，而且保存時間至少2年，但對一些營養(yǎng)要求比較高的菌種，存活率不理想。所以此方法適合實驗室一些營養(yǎng)要求不高的菌種較長時間的保存。