簡單介紹細胞劃痕試驗

【資料簡介】

細胞劃痕法是簡捷測定細胞遷移運動和修復能力的方法，類似體外傷口愈合模型，在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細胞上，用微量槍頭或其它硬物在細胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線，去除中央部分細胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)細胞至試驗設(shè)定時間，觀察周邊細胞是否遷移至中央劃痕區(qū)，以此判斷細胞的生長遷移能力。試驗通常需設(shè)定對照組和供試品組，通過不同分組之間的細胞對于劃痕區(qū)修復能力的不同可以判斷供試品遷移與修復能力。

適用對象：包括加了某種處理因素、藥物、重組蛋白、外源性基因、生長因子等供試品。

試驗示例

1. 試驗材料

2. 試驗步驟

1）用marker筆比著直尺在6孔板背后每孔橫向和縱向各三等份劃線做記號，將細胞按照5×105cell/孔接種，加入10%CS的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)24h，使形成單層細胞；

2）細胞培養(yǎng)結(jié)束后用10μL槍頭比著直尺對準孔板，輕推橫向、縱向劃線形成劃痕，用PBS漂洗細胞3次，去除劃掉的細胞；

3）在對照組和供試品組孔中分別加入2mL終濃度為0.5mg/mL的無血清培養(yǎng)基配制的人重組膠原蛋白和牛I型膠原蛋白，空白對照組只加入2mL無血清培養(yǎng)基；

4）轉(zhuǎn)移至37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中，于0h、24h/48h、72h時，以橫向和縱向的交點為核心，在40倍顯微鏡下拍照；

5）每組3個重復孔，共27個數(shù)據(jù)；

3. 試驗結(jié)果