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現(xiàn)貨供應小鼠循環(huán)復合物ELISA 檢測試劑盒

2012年09月06日 15:27:02人氣:583來源:上海通蔚生物科技有限公司

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關 鍵 詞小鼠循環(huán)復合物ELISA 檢測試劑盒
【資料簡介】

小鼠循環(huán)復合物ELISA 檢測試劑盒

用 途:
小鼠CIC ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、緩沖液中細胞上清液及各種體液中的CIC 。本試劑盒可以檢測天然和重組的CIC 。本試劑盒于科研、而非用于臨床診斷。

試驗原理:
小鼠CIC 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CIC 濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將CIC 和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CIC 的濃度呈比例關系。

自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

小鼠循環(huán)復合物ELISA 檢測試劑盒

安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項
1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

小鼠循環(huán)復合物ELISA 檢測試劑盒

樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

操作步驟
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。

結果分析
以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的CIC 標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的CIC 含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

局限
6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。

小鼠循環(huán)復合物ELISA 檢測試劑盒

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。
Mupirocin 莫匹羅星 [12650-69-0] 500mg
Myclobutanil 腈菌唑 [88671-89-0] 100g
Methyl 2,5-dihydroxybenzoate 龍膽酸甲酯 [2150-46-1] 25g
Methyl dihydrojasmonate 二氫茉莉酮酸甲酯 [24851-98-7] 100ml
Methylene blue, chloride, trihydrate 次甲基蘭三水 [7220-79-3] 50g
Methylene blue, chloride, trihydrate 次甲基蘭三水 [7220-79-3] 250g
Methylene blue, chloride, trihydrate 次甲基蘭三水 [7220-79-3] 25g
Methylene blue, chloride, trihydrate 次甲基蘭三水 [7220-79-3] 100g
Methylene blue, chloride, trihydrate 次甲基蘭三水 [7220-79-3] 500g
Methylene blue Solution, 100X 1 Solution 次甲基蘭溶液 [7220-79-3] 25ml
Methylene green zinc chloride double salt 次甲基綠 [224967-52-6] 5g
m-Methyl red 間甲基紅 [20691-84-3] 5g
Micrococcus lysodeikticus cells 溶壁微球菌細胞 / 5g
Micrococcus lysodeikticus cells 溶壁微球菌細胞 / 25g


 

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