植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A試劑盒說明書

【資料簡介】

主要用途

 植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶活性直接光度法定量檢測試劑是一種旨在運用3-羥-3-甲戊二酰輔酶A作為底物，在還原酶的催化下，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化后吸光峰值的降低，即采用光度法來測定植物裂解樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種植物組織，包括種子（seed）、葉片（leaf）、根（root）、胚胎葉（cotyledon）、上胚軸（epicotyl）等裂解懸液、微粒體，或純化酶樣品3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶的活性檢測，以及抑制劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。

技術(shù)背景

甲戊二羥酸通路（mevalonate pathway），又稱為3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶通路或甲戊二羥酸依賴性通路，是所有高等真核生物和許多細菌具有的重要的細胞代謝通路，用于體內(nèi)產(chǎn)生二甲基丙烯焦磷酸（dimethylallyl pyrophosphate；DMAPP）和異戊二烯焦磷酸（isopentenyl pyrophosphate；IPP）作為生物大分子合成的基礎(chǔ)，包括蛋白質(zhì)異戊二烯化、細胞膜維護、激素合成、蛋白固著、蛋白糖化等。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A還原酶（3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase；HMGR；EC1.1.1.34）是控制甲戊二羥酸通路的關(guān)鍵的酶，調(diào)節(jié)膽固醇和類異戊二烯脂分子的產(chǎn)生。HMG-COA還原酶位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上，含有8個跨膜結(jié)構(gòu)域，其中活性結(jié)構(gòu)域在細胞漿里。HMG-COA還原酶是許多降脂藥物的靶標(biāo)，包括lovastatin （Mevacor）、atorvastatin （Lipitor）、pravastatin（Pravachol）和simvastatin（Zocor）。在植物組織中，HMG-COA還原酶位于質(zhì)體、線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，含有2個跨膜結(jié)構(gòu)域，組織發(fā)育、光照、病原菌感染、創(chuàng)傷等將誘導(dǎo)HMG-COA還原酶活性增加。在HMG-COA還原酶的催化下，將4個電子的3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原為甲戊二羥酸（mevalonate），同時產(chǎn)生還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate；NADPH）被氧化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide phosphate；NADP），其氧化后的吸光峰值變化（340nm 波長），來定量分析3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶的活性。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶反應(yīng)系統(tǒng)為：