95-D高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）95-D高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 ：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞 ，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
1,3-Bis（diphenylphosphino）propane [DPPP] 1,3-雙（二苯基膦）丙烷 6737-42-4
1,3-Bis（tert-butyl）-1H-iMidazolin-3-iuM tetrafluoroborate  137581-21-6
1,3-Bis（triMethylsilyl）urea 六甲基二硅脲 18297-63-7
2-chlorobutadiene 2-氯-1,3-丁二烯 126-99-8
cyclobutane-1,3-dione  15506-53-3
1,3-Cyclohexanedione, 2-chloro-5,5-diMethyl- 2-氯-5,5-二乙基-1,3-環(huán)己二酮,98% 7298-89-7
cyclopentadiene 茂 542-92-7
1,3-Di（2-hydroxyethyl）-5,5-diMethylhydantoin 1,3-二羥乙基-5,5-二甲基海因 26850-24-8
1,3-Diacetoxy-2-（acetoxyMethoxy）propane 1,3-二乙酰氧-2-（二乙酰氧基甲氧基）丙烷 86357-13-3
1,3-DIAMINOACETONE DIHYDROCHLORIDE 1,3-二氨基丙酮二鹽酸鹽 61798-04-7
2,4-dioxo-1,3-diazetidine-1,3-bis（Methyl-M-phenylene） diisocyanate  26747-90-0
1,3-Dichloro-1,3,5-triazinane-2,4,6-trione 二氯異氰尿酸鈉（C3Cl2N3NaO3） 2782-57-2
1,3-Dichloro-2-propanol 1,3-二氯丙醇 96-23-1
1,3-DICHLORO-5-METHYLISOQUINOLINE 1,3-二氯-5-甲基異喹啉 21902-40-9
Dihydro-1,3-diMethyl-2-thioxo-4,6（1H,5H）-pyriMidinedione 1,3-二甲基-2-硫代*酸 3158-63-2
1,3-DiethynyltetraMethyldisiloxane 二乙炔基四甲基二硅氧烷 4180/2/3
1,3-Diglycidyl Glyceryl Ether 1,3-二環(huán)氧ganyou醚ganyou 3568-29-4
221352-10-9
Dihydroxyacetone phosphate lithiuM salt 二羥基丙酮磷酸酯二鋰鹽 102783-56-2
1,3-Dihydroxyacetone 1,3-二羥基丙酮 96-26-4
1,3-Dihydroxyacetone diMer 1,3-二羥基丙酮二聚體 62147-49-3
1,3-diisopropylurea  4128-37-4
1,3-DiMethoxypropan-2-one 1,3-二甲氧基乙酮 18664-32-9
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。