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HCT 116結(jié)腸癌細(xì)胞

參  考  價(jià):面議
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所在地上海市

更新時(shí)間:2016-07-13 11:46:33瀏覽次數(shù):316次

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上海谷研科技有限公司專業(yè)銷售原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞等細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品,*提供專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo),讓您的細(xì)胞培養(yǎng)研究更安心。咨詢HCT 116結(jié)腸癌細(xì)胞價(jià)格、說明書等信息。

HCT 116結(jié)腸癌細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清,ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清,新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體)HCT 116結(jié)腸癌細(xì)胞
(1) 收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測(cè)即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測(cè)。
(7)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
Oxyfedrine 安心酮 15687-41-9
OXYGEN-18O2, 97 ATOM 18O 氧18 32767-18-3
OxyMorphone 氫羥*酮 76-41-5
oxy-resveratrol 氧化白藜蘆醇 29700-22-9
Oxytocin * 50-56-6
p-(1,1-diMethylheptyl)phenol  30784-30-6
p-(1-Methyloctyl)phenol  17404-66-9
p-(1-pyrrolidinyl)phenol  1008-97-5
PalladiuM(II) nitrate 硝酸鈀 10102-05-3
PAGOCLONE 帕戈隆 133737-32-3
PaliferMin 帕利夫明 162394-19-6
palifosfaMide 帕利伐米 31645-39-3
PalladiuM fluoride(PdF2)  13444-96-7
PalladiuM hydroxide on carbon 50% water 氫氧化鈀 12135-22-7
PALYTOXIN (C52-55-半縮醛)海葵毒素 77734-91-9
PAMAM dendriMer, ethylenediaMine core, generation 7.0 solution  163442-70-4
PaMidronate disodiuM salt 帕米膦酸鈉 57248-88-1
P-AMinophenylethanol 4-氨基苯乙醇 104-10-9
panaxytriol 人參炔三醇 87005-03-6
Pancratistatin  96203-70-2
PanipeneM * 87726-17-8
p-Anisic Acid 對(duì)甲氧基苯甲酸 100-09-4
細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時(shí)后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

SMC-1胸膜細(xì)胞瘤

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NCI-H446 H446小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

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QGY-7701肝癌細(xì)胞

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