COLO 205結(jié)腸癌細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）COLO 205結(jié)腸癌細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞 ，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
OCTAHYDROANTHRACENE  1079-71-6
OctaMethylcyclotetrasiloxane 八甲基環(huán)四硅氧烷 556-67-2
N-acetyl-L-carnosine N-乙酰肌肽 56353-15-2
N-acetylbenzoquinoneiMine N-ACETYL-4-BENZOQUINONE IMINE 50700-49-7
N-ACETYL-5-HYDROXYTRYPTAMINE N-乙酰-5-羥色胺 1210-83-9
N-ACETYL-ALPHA-D-GLUCOSAMINE 6-PHOSPHATE DISODIUM SALT N-乙酰-A-D-氨基葡萄糖-1-磷酸酯 31281-59-1
N-acetyldopaMine  2494/12/4
Naphyrone O-2482 850352-53-3
Naproxen * 22204-53-1
Naproxen SodiuM *鈉 26159-34-2
Naringin 川陳皮素 10236-47-2
NARINGINASE 柚苷酶 9068-31-9
N-BENZOYL-L-ASPARTIC ACID-Beta-METHYL ESTER N-苯甲酰-L-天*-β-甲酯 39741-26-9
N-benzyl cinchonidiniuM chloride N-芐基氯化辛可寧丁 69257-04-1
N-Boc-（4-diethylphosphonoMethyl）-L-phenylalanine  142348-55-8
N-BoC-1,6-hexanediaMine hydroChloride N-BOC-1,6-己二胺鹽酸鹽 65915-94-8
N-BOC-3-（iodoMethyl）-2-oxa-8-azaspiro[4.5]decane N-BOC-3-（碘甲基）-2-氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷 1250998-93-6
N-Boc-3,4-dehydro-D.proline  58617-29-1
tert-butyl 6-（4,4,5,5-tetraMethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl）-3,4-dihydropyridine-1（2H）-carboxylate N-叔丁氧羰基-3,4-二氫吡啶-6-硼酸頻哪醇酯 865245-32-5
N-BOC-3-CARBOETHOXY-4-PIPERIDONE 1-N-Boc-4-氧代-3-哌啶羧酸乙酯 98977-34-5
N-Boc-3-piperidineacetic acid N-Boc-3-哌啶乙酸 183483-09-2
N-Boc-3-piperidineacetic acid （S）-3-Boc-氨基哌啶 216854-23-8
N-BOC-4- piperidine propionic acid 1-叔丁氧羰基-4-哌啶丙酸 154375-43-6
N-Boc-4-Chloropiperidine 1-BOC-4-氯哌啶 154874-94-9
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來(lái)，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過(guò)夜，第二天放入液氮罐保存
原則　　慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過(guò)1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過(guò)夜。第二天放入液氮中。