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3T3-L1小鼠脂肪細胞

參  考  價:面議
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產(chǎn)品型號

品牌

廠商性質(zhì)代理商

所在地上海市

更新時間:2016-07-16 06:48:09瀏覽次數(shù):287次

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3T3-L1小鼠脂肪細胞上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,gibco特優(yōu)級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體)3T3-L1小鼠脂肪細胞
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調(diào)整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
N-CHLOROCARBONYL ISOCYANATE N-(氯甲酰)異氰酸酯 27738-96-1
octenidine hydrochloride 奧替尼啶,奧克太啶 70775-75-6
N-(DiphenylMethylene)glycine benzyl ester N-二苯亞甲基*芐酯 81477-91-0
N-(DiphenylMethylene)glycine ethyl ester 二苯亞甲基*乙酯 69555-14-2
N-(Hydroxyethyl)-urea  1320-51-0
N-(ISO-BUTOXY METHYL)METHACRYLAMIDE 2-甲基-N-[(2-甲基丙氧基)-甲基]-2-丙烯酰胺 4548-27-0
N-(Tallowalkyl)-2,2'-{{3-[(2-hydroxyethyl)-aMino]-propyl}-iMino}-bis (ethanol)  90367-27-4
N-(tert-Butoxycarbonyl)sulfaMide N-(氨基磺酰基)氨基甲酸叔丁酯 148017-28-1
N-(TriMethylsilyl)-4-[(triMethylsilyl)oxy]-2-aMine-1,3,5-triazin N-(*基硅基)-4-(*基硅氧基)-1,3,5-三嗪-2-胺 52523-35-0
N-(VINYLBENZYL)-2-AMINOETHYL 3-AMINOPROPYLTRIMETHOXYSILANE HCL SALT N-[4-乙烯苯基)甲基]-N’-[3-(*氧基硅烷基)丙基]-1,2-乙二胺單鹽酸鹽(9CI) 33401-49-9
N,N'-bis[3-(triethoxysilyl)propyl]ethylenediaMine  30858-91-4
N,N-Diethylcy* N-氰基二乙基胺 617-83-4
N,2,3-TriMethyl-2-isopropylbutaMide N,2,3-*基-2-異丙基丁酰胺 51115-67-4
N,2-diethyl-2-(isopropyl)-3-MethylbutyraMide  51115-70-9
N,N′-METHYLENEBISMETHACRYLAMIDE N,N'-亞甲基雙甲基丙烯胺 2359-15-1
N,N,2-triMethylquinolin-6-aMine N,N,2-*基喹啉-6-胺 92-99-9
N,N,N',N'-TetraMethylguanidiniuM azide  56899-56-0
N,N,N,N-tetraMethylMethanediaMine  102830-06-8
N,N,N'N'-tetraMethyl-1,3-benzenediaMMine  22440-93-3
N,N,N-TRIMETHYLGLYCINE-N-HYDROXYSUCCINIMIDE ESTER, BROMIDE  42014-55-1
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

SMC-1胸膜細胞瘤

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QGY-7701肝癌細胞

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