免疫金銀染色方法敏感、簡便、省時(shí)、安全可靠，葡萄球菌A蛋白（SPA）金標(biāo)記四步法是在此基礎(chǔ)上發(fā)展起來的更為敏感的一種新方法。SPA和許多哺乳類動(dòng)物IgG具有親和性，且它們之間的連接不會(huì)干擾抗原——抗體的結(jié)合。簡單的SPA金標(biāo)記二步法后，第三步用抗SPA與SPA金表面分子通過Fab或Fc段相結(jié)合，結(jié)果結(jié)合更多的膠體金顆粒，再通過銀增強(qiáng)，使原始信號得到幾何級放大，其染色原理見圖。

雙PAG免疫金銀染色原理

（一）染色流程：

（1）石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，0.05mol/L（pH7.4）TBS洗3×3min.

（2）0.1%*37℃消化20min,或抗原修復(fù)20min（98℃），自然冷卻至室溫。

（3）0.05mol/L（pH7.4） TBS洗3×3min.

（4）1%EA（卵蛋白）15min,不洗。

（5）適當(dāng)稀釋的特異抗體室溫4h或4℃孵育20h,或37C孵育30min.

（6）0.05mol/L（pH7.4）TBS洗3×5min.

（7）0.02mol/L（pH7.4）TBS（內(nèi)含0.1%BSA）洗10min.

（8）1%EA 15min,不洗，滴加PAGlonm 1:40稀釋，室溫1h,

（9）0.05mo!/L（pH7.4）TBS洗10min.

（10）兔抗SPAIgGl:400稀釋，37℃ 30min.

（11）0.05mol/L（pH7.4）TBS洗10min.

（12）滴加PAGlonm 1:60稀釋，室溫1h,或37℃ 30min.

（13）0.05mol/L（pH7.4）TBS洗10min.

（14）1%戊二醛洗10min.

（15）雙蒸水洗5min.

（16）1%明膠洗5min.

上海友騰生物傾力為客戶提供上萬種科研試劑，提供*、zui全、zui有效的科研試劑產(chǎn)品，質(zhì)量被全國各大院?？蒲袡C(jī)構(gòu)認(rèn)可。

 鄭重聲明：請客戶在取材前盡量先與我公司銷售技術(shù)人員溝通，前期的取材直接影響到您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。我們有成套的售前售后服務(wù)，.凡是購買公司試驗(yàn)用產(chǎn)品，本公司無償提供。凡是購買本公司elisa試劑盒，本公司免費(fèi)代測，產(chǎn)品耐用，性價(jià)比好，值得信賴。
服務(wù)承諾：1.凡在本司購買elisa試劑盒的客戶，可享受我司提供免費(fèi)代測服務(wù)及中英文雙版說明書
          2.我司對售出產(chǎn)品提供完整售后服務(wù),本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!
本公司*供應(yīng)科研用elisa試劑盒，價(jià)格合理，確屬質(zhì)量問題可包換包退，免除您的后顧之憂。，如有問題可與我司業(yè)務(wù)員!我們會(huì)以zui快的速度為你解決一切問題，
提供各種種屬、各種系列ELISA試劑盒，于實(shí)驗(yàn)室科學(xué)研究用，不適用于臨床診斷。提供免費(fèi)代測服務(wù)，詳情請您。