水土中亞硝酸鹽含量測定試劑盒說明書 
                                                                  分光光度法 50 管/48 樣 
注意：正式測定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。 
測定意義 
亞硝酸鹽廣泛存在于水體和土壤中，不僅是有機(jī)氮分解的重要中間產(chǎn)物，也可能來自污
染。人體攝入過量后，可誘發(fā)消化系統(tǒng)癌變。 
水土中亞硝酸鹽含量測定試劑盒說明書 測定原理 
在酸性條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸反應(yīng)生成重氮化合物，再與 N-1-萘基乙二胺
形成紫紅色偶氮化合物，在 540nm處有特征吸收峰。 
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 
天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水。 
試劑組成和配制 
提取液：液體 100mL× 1 瓶，室溫保存。 
試劑一：液體 25mL× 1 瓶，4℃避光保存。 
試劑二：液體 25mL× 1 瓶，4℃避光保存。 
樣品處理 
1.  土壤樣品：準(zhǔn)確稱取過篩后的土壤約 1g，加入2 mL  提取液，室溫震蕩 1h，8000g，25
℃離心 15min，靜置，待其分層后，取上清液待測。 
2.  水樣：直接檢測；如果渾濁，可以離心后再測定。 
水土中亞硝酸鹽含量測定試劑盒說明書 測定步驟和操作表 
  空白管  測定管 
樣品（µ L）    1000 
試劑一（µL）  500  500 
試劑二（µL）  500  500 
H2O  1000   
混勻，25℃靜置 15min，1mL 玻璃比色皿，空白管調(diào)零，測定 A540       
注意：空白管只需測定一次。 
亞硝酸鹽含量計(jì)算 
標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：y= 0.011x + 0.0216，R2
= 0. 9991 
 
（1）土壤樣品：NO2
-
（μ moL/g）=（A540 測定管  -0.0216）÷0.011× V 反總÷(V 樣÷V 樣總
×W)× 10-3
=
11
4
×（A540 測定管  - 0.0216）÷W 
（2）水樣：NO2
-
（μ moL /mL）=（A540 測定管  -0.0216）÷0.011× V反總÷V樣× 10-3
 
                                                          =
11
2
×（A540 測定管  - 0.0216） 
V樣總：加入提取液體積，2mL；V 反總：反應(yīng)總體積，2 mL；V樣：反應(yīng)中樣品體積，1mL；
W：樣品質(zhì)量，g 
注意事項(xiàng) 
1.  試劑盒 2-8℃保存。 
2.  試劑對(duì)人體有一定的危害，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，戴手套操作。 
 3.  zui低檢出限為 1.97μ moL /L。