咱們知道，ELISA試劑盒可分為多種類型測定，是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫剖析技能。 我公司技能部將各種Elisa常用辦法的優(yōu)勢(shì)下風(fēng)進(jìn)行比照，成果如下：
一、直接法(direct Elisa)
將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號(hào)的一級(jí)抗體，即可測定抗原總量，此一級(jí)抗體的特異性非常重要。
1.優(yōu)勢(shì)：操作手續(xù)簡略，因無須使用二抗可避免交互反響。
2.下風(fēng)：實(shí)驗(yàn)中的一抗都得用酶符號(hào)，但不是每種抗體都適合做符號(hào)，費(fèi)用相對(duì)進(jìn)步。
二、間接法(indirect Elisa)
此測定辦法與直接法類似，不一樣在于一級(jí)抗體沒有酶符號(hào)，改用酶符號(hào)的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來測定抗原量。
1.優(yōu)勢(shì)：二抗能夠加強(qiáng)信號(hào)，并且有多種挑選能做不一樣的測定剖析。不加酶符號(hào)的一級(jí)抗體則能保存它zui多的免疫反響性。
2.下風(fēng)：交互反響發(fā)作的機(jī)率較高。
三、雙抗體夾心法(sandwich Elisa)
被檢查的抗原包被在兩個(gè)抗體之間，其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢查抗體，此抗體可用酶符號(hào)后直接測定抗原的量；或不符號(hào)，再透過酶符號(hào)的二級(jí)抗體來測定抗原的量。這兩種抗體有必要當(dāng)心選擇，才可避免交互反響或競賽一樣的抗原結(jié)合部位。
1.優(yōu)勢(shì)：高活絡(luò)、高專一性，抗原無須事先純化。
2.下風(fēng)：抗原必定得具有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。
四、競賽法(competitive Elisa)
樣本里的抗原(自在抗原)和純化并固定在固相載體上的抗原(固定抗原)一同競賽一樣的抗體，當(dāng)樣品里的自在抗原越多，就能夠結(jié)合越多的抗體，而固定抗原就只能結(jié)合到較少的抗體，反之亦然。經(jīng)清潔過程，洗去自在抗原和抗體的復(fù)合物，只留下固定抗原和抗體的復(fù)合物，拿來與只要固定抗原的對(duì)照組成果相比較，依據(jù)呈色差異就可計(jì)算出樣品里的抗原含量。
1.優(yōu)勢(shì)：可適用比較不純的樣本，并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
2.下風(fēng)：全體的敏感性和專一性都較差。
五、ELISA技能：根據(jù)細(xì)胞法(cell-based Elisa)
是一種新的定性蛋白檢查技能，將細(xì)胞直接在微孔板里培育，待檢查時(shí)，不需抽提蛋白和裂解細(xì)胞，便可直接丈量微孔板里蛋白經(jīng)影響或抑制作用后的改變。
1.優(yōu)勢(shì)：無需裂解細(xì)胞，所以方針蛋白丟失起碼，可測定完好細(xì)胞、黏附細(xì)胞、還有非粘附細(xì)胞。
2.下風(fēng)：不能測定抗原量。
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