肌酸激酶(CK)測(cè)試盒(輔酶Ⅱ系列)
測(cè)定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心臟、肌肉以及腦等組織中,能可逆地催化肌酸與ATP之間的轉(zhuǎn)磷?;磻?yīng),在能量運(yùn)轉(zhuǎn)、肌肉收縮和ATP再生中有重要作用,是臨床診斷心腦疾病的一個(gè)重要指標(biāo)。
肌酸激酶(CK)測(cè)試盒(輔酶Ⅱ系列)
測(cè)定原理:
CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP與葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化6-磷酸葡萄糖與NADP+生成NADPH,導(dǎo)致340nm光吸收值增加。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑1瓶,4℃避光保存,使用前加15mL蒸餾水溶解。
試劑二:液體15mL×1瓶,4℃保存。
工作液:臨用前根據(jù)用量將試劑一和試劑二以1:1混合。使用前37℃溫育2min。
粗酶液提?。?br/>
1.組織樣本:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測(cè)。
2.血清樣本:直接測(cè)定。
測(cè)定操作表:
1. 紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2.在1 mL石英比色皿中加入200μL樣本和300μL蒸餾水,后加入500μL工作液,立即混勻,37℃下測(cè)定初始吸光值A(chǔ)1與1min后的吸光值A(chǔ)2,ΔA=A2-A1。