ELSIA操作步驟復雜，影響反應因素較多，RANKL Elisa kit特別是固相載體的包被難達到各個體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標準曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，RANKL Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。

RANKL Elisa kit技術操作要點：

1. 標本的采取和保存。
2. 試劑的準備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。RANKL Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，RANKL Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預包被，其后通過抗原抗體反應使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，RANKL Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

RANKL Elisa kit相關產(chǎn)品*：xyA163Hu    人組織多肽抗原(TPA)檢測試劑盒    ELISA Kit for Tissue Polypeptide Antigen (TPA)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA165Hu    人*原A(PGA)檢測試劑盒    ELISA Kit for Pepsinogen A (PGA)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA166Hu    人*原C(PGC)檢測試劑盒    ELISA Kit for Pepsinogen C (PGC)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA167Hu    人前列腺素E合酶(PTGES)檢測試劑盒    ELISA Kit for Prostaglandin E Synthase, Microsomal (PTGES)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA168Hu    人前列腺酸性磷酸酶(ACP3)檢測試劑盒    ELISA Kit for Acid Phosphatase 3, Prostatic (ACP3)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA174Hu    人髓鞘型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP8)檢測試劑盒    ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 8, Myelin (FABP8)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA180Hu    人Ⅳ型膠原(COL4)檢測試劑盒    ELISA Kit for Collagen Type IV (COL4)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA213Hu    人髓細胞觸發(fā)受體1(TREM1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Triggering ReHZptor Expressed On Myeloid HZlls 1 (TREM1)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA228Hu    人抗繆勒管激素(AMH)檢測試劑盒    ELISA Kit for Anti-Mullerian Hormone (AMH)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA234Hu    *G4(IgG4)檢測試劑盒    ELISA Kit for Immunoglobulin G4 (IgG4)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA252Hu    人載脂蛋白C1(APOC1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Apolipoprotein C1 (APOC1)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA253Hu    人麥芽糖酶糖化酶(MGA)檢測試劑盒    ELISA Kit for Maltase Glucoamylase, Intestinal (MGA)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA259Hu    人膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)檢測試劑盒    ELISA Kit for Annexin A5 (ANXA5)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA260Hu    人β2-微球蛋白(β2M)檢測試劑盒    ELISA Kit for Beta-2-Microglobulin (b2M)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA262Hu    人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)檢測試劑盒    ELISA Kit for Transferrin ReHZptor 2 (TFR2)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA275Hu    人抗SSB/La抗體(Anti-La)檢測試劑盒    ELISA Kit for Anti-SSB/La Antibody (Anti-La)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA277Hu    人間隙連接蛋白43(CX43)檢測試劑盒    ELISA Kit for Connexin 43 (CX43)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA278Hu    人踝蛋白(TLN)檢測試劑盒    ELISA Kit for Talin (TLN)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA281Hu    人B-細胞激活因子受體(BAFFR)檢測試劑盒    ELISA Kit for B-HZll Activation Factor ReHZptor (BAFFR)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA282Hu    人組蛋白H2A(H2A)檢測試劑盒    ELISA Kit for Histone H2A (H2A)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA288Hu    人抗雙鏈DNA抗體(Anti-dsDNA)檢測試劑盒    ELISA Kit for Anti-Double Stranded DNA Antibody (Anti-dsDNA)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA306Hu    人組織蛋白酶L(CTSL)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cathepsin L (CTSL)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA310Hu    人載脂蛋白H(APOH)檢測試劑盒    ELISA Kit for Apolipoprotein H (APOH)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml