小鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒樣品的收集、處理及保存方法：

1、血清→操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、血漿→EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、細(xì)胞上清液→1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、組織勻漿→將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。

5、保存→如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

小鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒的實驗操作中應(yīng)注意以下條款：

●試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

●實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

●不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

●使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

●使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

●底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

●加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

●按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

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