魚elisa試劑盒的洗滌：

洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來?？梢哉f在ELISA操作中，洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)引起操作者的高度重視，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌，不得馬虎。除ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外，還有手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。

不可重復(fù)用的，因?yàn)榘蹇咨系目贵w做過一次之后就已經(jīng)結(jié)合掉了，要重復(fù)做的話，肯定只能買新的試劑盒。試劑盒在大量操作的時候都是比較簡單的，zui起碼在同一個人操作的時候，一般不會出現(xiàn)太大的偏差。如果是96孔板的話，96孔板的孔可以拆卸下來，當(dāng)然可以這次用幾個，下次用幾個的，大大提高了實(shí)驗(yàn)的效率！

魚elisa試劑盒

在使用之前，要將所有需要使用的試劑充分搖勻。為避免在加樣的過程中產(chǎn)生不必要的誤差,需將液體處置好避免其產(chǎn)生過多的泡沫。即在加樣時加入大量的氣泡。根據(jù)來源、標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件，可得知有雙抗體夾心法、雙位點(diǎn)一步法、競爭法等檢測方法。

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

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