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　　人elisa試劑盒的制備要點(diǎn)：

　　1、隨著人們對(duì)病原體感染與機(jī)體免疫應(yīng)答的逐步認(rèn)識(shí)，以抗原抗體特異反應(yīng)為基礎(chǔ)的，更為快速簡(jiǎn)便的免疫檢驗(yàn)方法就應(yīng)運(yùn)而生了。

　　2、試驗(yàn)中各個(gè)操作步驟常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，希望能夠?qū)σ恍┏醪綄W(xué)習(xí)者有所幫助：這些難于采用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法檢測(cè)的病原體感染診斷治療的要求，迫使人們必須去尋找其他的檢測(cè)途徑，直接的或是間接的。

　　人elisa試劑盒質(zhì)量保證是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測(cè)的質(zhì)量：

　　一、方法學(xué)的影響

　　ELISA測(cè)定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法，其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法（HBeAb,HBcAb等采用）因受操作時(shí)差所引起的不*平競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響，結(jié)果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難控制。

　　二、試劑因素

　　不同批次的ELISA試劑在制作過(guò)程中很難保證質(zhì)量**，即使是通過(guò)批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)結(jié)果也存在差異，因此必須選擇和訂購(gòu)長(zhǎng)批號(hào)的試劑，并保證保存條件。

　　三、樣本因素

　　標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素，前者包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等，后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。

　　四、操作因素對(duì)小鼠腫瘤標(biāo)志物（CA724）ELISA試劑盒結(jié)果的影響：加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。

　　五、灰區(qū)的設(shè)置

　　通常情況下，ELISA定性實(shí)驗(yàn)以“陽(yáng)性”和“陰性”來(lái)報(bào)告結(jié)果，兩者間有一條分界線被稱(chēng)為“陽(yáng)性判斷值”（cut-off value，CO值），這是定性免疫測(cè)定結(jié)果報(bào)告的依據(jù)。

　　六、標(biāo)本復(fù)查

　　ELISA手工檢測(cè)過(guò)程復(fù)雜，影響因素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控，也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異，因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法。