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微生物內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒

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更新時間:2019-04-30 10:06:50瀏覽次數(shù):404次

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目前使用的酶聯(lián)免疫檢測方法很多,其中微生物內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒按檢測目的可分為:
間接法——用于測定抗體
雙抗體夾心法——主要用于測定大分子抗原
競爭抑制法——主要用于測定小分子抗原

微生物內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒的分類:

1.雙抗體夾心法測抗原

雙抗體夾心法是檢測抗原常用的方法,操作步驟如下:

1)將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。

2)加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。

3)加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。

4)加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測知標(biāo)本中抗原的量。

2.雙抗原夾心法測抗體

反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物,以檢測相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,可直接用于測定,因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,尋找合適的標(biāo)記方法。

3.間接法測抗體

間接法是檢測抗體常用的方法。其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體)以檢測與固相抗原結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法。

4.競爭法測抗原

小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點(diǎn),因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定,可以采用競爭法模式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量含量愈多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少,后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。

5.ABS-ELISA法

ABS為親和素(avidin)生物素(biotin)系統(tǒng)(system)的略語。親和素是一種糖蛋白,分子量60000,每個分子由4個能和生物素結(jié)合的亞基組成。生物素為小分子化合物,分子量244。用化學(xué)方法制成的衍生物素-羥基琥珀酰亞胺酯可與蛋白質(zhì)和糖等多種類型的大小分子形成生物素標(biāo)記產(chǎn)物,標(biāo)記方法頗為簡便。

鄭重聲明:微生物內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷!

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