![]() |
上海莼試生物技術(shù)有限公司
主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒報價 |

聯(lián)系電話
13585831301
公司信息
- 聯(lián)系人:
- 李小姐
- 電話:
- 021-59541103
- 手機(jī):
- 13585831301
- 售后電話:
- 13585831301
- 傳真:
- 021-60443211
- 地址:
- 上海市嘉定區(qū)嘉羅公路1661號
- 郵編:
參考價 | 面議 |
- 型號 50T
- 品牌 其他品牌
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 所在地 上海市
更新時間:2021-07-12 12:33:49瀏覽次數(shù):225
聯(lián)系我們時請說明是環(huán)保在線上看到的信息,謝謝!
?
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:腦膜炎奈瑟菌血清群W135PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號:CP99241
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
使用方法:
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進(jìn)行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
肌侵蛋白(MTPN)elisa試劑盒英文名稱:MTPN ELISA Kit磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體規(guī)格:5g
肌腱蛋白X(TNX)elisa試劑盒英文名稱:TNX ELISA Kit磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體規(guī)格:5MG
肌肌酸激酶(CKM)elisa試劑盒英文名稱:CKM ELISA Kit磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體規(guī)格:1g
肌紅蛋白(MYO)elisa試劑盒英文名稱:MYO ELISA Kit磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體規(guī)格:5g
三磷酸酶(ITPA)elisa試劑盒英文名稱:ITPA ELISA KitβA3/A1-crystallin蛋白抗體規(guī)格:25g
肌鈣蛋白T(TNT)elisa試劑盒英文名稱:TNT ELISA KitγS-crystallin蛋白抗體規(guī)格:100g
肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基4(ARPC4)elisa試劑盒英文名稱:ARPC4 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框85抗體規(guī)格:25g
饑餓素(GHRL)elisa試劑盒英文名稱:GHRL ELISA Kit1號染色體開放閱讀框87抗體規(guī)格:5g
回腸脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP6)elisa試劑盒英文名稱:FABP6 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框95抗體規(guī)格:25g
黃體激素(LH)elisa試劑盒英文名稱:LH ELISA Kit補(bǔ)體C1S鏈多肽抗體規(guī)格:5g
脫氫酶(XDH)elisa試劑盒英文名稱:XDH ELISA Kit20號染色體開放閱讀框106抗體規(guī)格:50g
緩激肽(BK)elisa試劑盒英文名稱:BK ELISA Kit20號染色體開放閱讀框107抗體規(guī)格:100g
環(huán)氧化合物解酶4(EPHX4)elisa試劑盒英文名稱:EPHX4 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框117抗體規(guī)格:25g
環(huán)加氧酶2(PTGS2)elisa試劑盒英文名稱:PTGS2 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框118抗體規(guī)格:100g
環(huán)加氧酶1(PTGS1)elisa試劑盒英文名稱:PTGS1 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框144抗體規(guī)格:25g
腦膜炎奈瑟菌血清群W135PCR檢測試劑盒肌球蛋白輕鏈激酶抗體甘肽受體4(GALR4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) Carboxypeptidase B
MYCBPAP抗體甘肽受體3(GALR3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) Cobalt (II) carbonate, hydrate
組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體甘肽受體2(GALR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) dTDP
線粒體核糖體蛋白S22抗體金屬硫蛋白1X(MT1X)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) Galactose oxidase
棕櫚酰化膜蛋白7抗體金屬硫蛋白1H(MT1H)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) Iron (II) oxalate, dihydrate
小鼠抗單克隆抗體金屬硫蛋白1F(MT1F)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) Lead (II) chloride
肌球蛋白輕鏈1/3抗體金屬硫蛋白1G(MT1G)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) Lithium citrate, tetrahydrate
磷酸化肌球蛋白輕鏈抗體金屬硫蛋白1B(MT1B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) MU-Gal