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從標本收集、保存、預(yù)試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：TI-Ag胸腺非依賴性抗原酶聯(lián)免疫試劑盒

英文名稱：TI-Ag ELISA Kit

規(guī)格：48T/96

貨號：CS-2264E

主要成分：酶標板,試劑,標準品等。

試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..

試劑盒組成及試劑配制：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

試劑準備：

1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。

2. 標準品(凍干品)：每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管，每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

注意事項：

1.試劑盒使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標準品若未用完，請廢棄。

2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。

（加熱溫度不要超過50℃）使用時洗滌液應(yīng)為室溫。

4. 不同批號的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。

5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。

6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。

7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗結(jié)果。

8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時，請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行。

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TI-Ag胸腺非依賴性抗原酶聯(lián)免疫試劑盒α--D-甘露糖苷 99%大鼠芳烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白1(ARNTL)免疫試劑盒羥類固脫氫17β3抗體HCV-Core protein  型肝炎病-C區(qū)抗體

D-甘露糖 for cell culture,≥99%大鼠泛素連接(E3/UBPL)免疫試劑盒羥類固脫氫11β1抗體HCN4  環(huán)化核苷調(diào)控陽離子通道蛋白亞型4

5-吡-2-羧酯 98%大鼠泛素結(jié)合UBC5 免疫試劑盒滋養(yǎng)層抗原3β-HSD抗體HCN3  /鈉超化激活環(huán)核苷門控通道蛋白3抗體

4--α-D-半糖苷 99%大鼠泛素結(jié)合(E2/UBCE)免疫試劑盒乙?；M蛋白H4抗體HCN2  /鈉超化激活環(huán)核苷門控通道蛋白2抗體

茚三酮，水合 ACS reagent, ≥98.0% (UV)大鼠泛素激活(E1/UBAE)免疫試劑盒化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1HCMV UL49  人巨病UL49蛋白抗體

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2--β-D-半糖苷 99%，non-animal origin大鼠二肽肽Ⅳ(DPPⅣ)免疫試劑盒硫乙酰肝素蛋白多糖2HCLS1/LckBP1  造血干特異性蛋白抗體

對-α-D-葡萄糖苷 99%大鼠二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)免疫試劑盒肝癌相關(guān)抗原h(huán)ca25aHck  造血激抗體

β-煙酰腺嘌呤二核苷 97%大鼠二氧化(DAO)免疫試劑盒己糖激3抗體HCG/LH/FSH/TSH alpha  α亞抗體(Cg A)

β-煙酰腺嘌呤二核苷 99%大鼠兒茶酚抑素免疫試劑盒人乙肝病pre S1/S2蛋白抗體HCG Beta(4H7)  β亞單抗

N-壬酰-N-葡萄糖 99%大鼠兒茶酚(CA)免疫試劑盒人乙肝病pre S1蛋白抗體HCG alpha(4A8)  α 亞單抗

1-萘單鈉鹽，一水 98%大鼠多藥耐藥蛋白1(ABCB1)免疫試劑盒己糖激1抗體HCF2/Heparin Cofactor II  肝素輔助因子II抗體

4--N-乙酰-β-D-氨半糖苷 98%大鼠多肽YY/酪酪肽(PYY)免疫試劑盒己糖激2抗體HCF-1  宿主因子1抗體

操作步驟：

1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）

2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。