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目錄:上海根生生物科技有限公司>>其它耗材與試劑>> Fermentas RNase Inhibitor RNA酶抑制劑EO0381

Fermentas RNase Inhibitor RNA酶抑制劑EO0381
  • Fermentas RNase Inhibitor RNA酶抑制劑EO0381
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更新時(shí)間:2024-04-15 14:59:23瀏覽次數(shù):6511評(píng)價(jià)

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Fermentas RNase Inhibitor RNA酶抑制劑EO0381  的詳細(xì)介紹

Fermentas RNase Inhibitor RNA酶抑制劑EO0381
產(chǎn)品信息:

特點(diǎn)

 

  • 應(yīng)用范圍廣,適合多種使用條件。
  • 保護(hù)RNA,使其免受降解。zui高有效溫度達(dá)55°C。

應(yīng)用

 

  • 抑制RNA降解,應(yīng)用如下:
    一 體外轉(zhuǎn)錄(1);
    一 cDNA合成(2);
    一 體外翻譯(3);
    一 分離含有mRNA-蛋白復(fù)合物的哺乳動(dòng)物細(xì)胞組分(3);
    一 RNA擴(kuò)增(4)。
  • RNA純化和保存。
  • 分離和鑒定特殊的核酸酶活性(5)。
  • 腫瘤抑制研究(6)。

說(shuō)明

Ribolock™ RNase Inhibitor按1:1比例非競(jìng)爭(zhēng)性與RNases A(見(jiàn)圖1)、B和C結(jié)合,從而抑制RNases A、B和C的活性。但是其不能抑制真核生物RNases T1、T2、U1、U2、CL3和原核生物RNases I和H的活性。

 

來(lái)源

大腸桿菌菌株,含有編碼哺乳動(dòng)物核酸酶抑制劑的克隆基因。

 

分子量

49.6 kDa,單體。

 

活性單位定義

1個(gè)活性單位是指50%抑制5? ng RNase A活性所需Ribolock™ RNase Inhibitor用量。

抑制劑活性分析混合物:100 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1.2 mM EDTA, 0.1 mg/ml BSA, 100 ng/ml RNase A, 0.1 mg/ml [3H]-RNA, 50 mg/ml酵母RNA, 8 mM DTT。

 

保存緩沖液

保存緩沖液組分:
20 mM HEPES-NaOH (pH 7.5), 50 mM NaCl, 8 mM DTT, 0.5 mM ELUGENT變性劑和50% (v/v)甘油。

 

質(zhì)量控制

相關(guān)測(cè)試表明無(wú)內(nèi)切或外切脫氧核糖核酸酶、磷酸酶、核糖核酸酶污染。功能測(cè)試方法為RNA和cDNA的合成。

 

抑制與失活

  • 抑制劑:常用變性劑(SDS、尿素)和所有氧化劑(對(duì)-氯汞基苯甲酸鹽、溶解氧、高氧化狀態(tài)的離子)可強(qiáng)烈抑制RiboLock™ RNase Inhibitor并釋放被結(jié)合的RNase。
  • 失活:75°C加熱10分鐘;70°C加熱10 分鐘仍然可檢測(cè)到活性殘留。

 

備注

  • 保存緩沖液中的DTT可確保Ribolock™ RNase Inhibitor長(zhǎng)期保存的穩(wěn)定性,其并非抑制劑活性發(fā)揮的必需品。
  • 推薦濃度 – 1 unit/μl/μlμl反應(yīng)體系。


 
 

圖1。Ribolock™ RNase Inhibitor對(duì)RNase A的抑制效果分析。
37°C時(shí),人RNA (1? μg)中添加20 u Ribolock™ RNase Inhibitor和不同量的RNase A(不含DNase和蛋白酶,#EN0531)。
M – RiboRuler™ High Range RNA Ladder
C1 – 人總RNA
C2 – 人總RNA,含RNase A
1-4 – 人總RNA,含RiboLock™ Ribonuclease Inhibitor和RNase A

 

圖2。Ribolock™ RNase Inhibitor熱穩(wěn)定性。
人的總RNA (1? μg)中添加20 u Ribolock™ RNase Inhibitor和50 pg RNase A(不含DNase和蛋白酶,#EN0531),不同溫度條件下孵育。
M – RiboRuler™ High Range RNA Ladder
C1 – 人總RNA
C2 – 人總RNA,含RNase A
1-5 – 人總RNA,含RiboLock™ Ribonuclease Inhibitor和RNase A
 

 

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