熒光素標記銜接蛋白β抗體IgG 
規(guī)格：100ug和500ug
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（一）酪蛋白的制備取新鮮牛乳100ml，放入250 ml 燒杯中加熱至40℃.加入100ml 加熱至同樣溫度的醋酸緩沖液，一邊加一邊搖動，并用pH為4.7（用1%NaOH 或10%醋酸進行調(diào)整）。冷卻至室溫，繼續(xù)放置5 分鐘,然后用細紗布或濾紙過濾。濾液為乳清保留以下做鑒定。過濾所得沉淀物,用少量蒸餾水洗幾次，過濾。將洗凈的沉淀物懸浮在約30ml 乙醇中，
熒光素標記銜接蛋白β抗體IgG  

用布氏漏斗抽濾。所得沉淀用乙醇和等量混合液洗滌兩次，抽干。zui后用50ml 洗一次并抽干。取出抽干的粉狀物，攤開在表面皿上， 使*揮發(fā)。稱其干重計算其產(chǎn)量。
（二）酪蛋白的性質(zhì)鑒定 蛋白實驗技術論壇
1.溶解度:取試管6 支,分別加水、10%氯化鈉、0.5%氯化鈉，0.1N 氫氧化鈉、0.2%鹽酸及飽和氫氧化鈣溶液各2ml。于每管中加入少量酪蛋白。不斷搖蕩，觀察并記錄各管中的酪蛋白溶解度。
2、米倫反應1：取酪蛋白少許，放置于試管中。加入1ml 蒸餾水，再加入米論試劑10 滴，振搖，并徐徐加熱。觀察其顏色變化。
3、含硫（*、半*和蛋氨酸）測定：取少量酪蛋白溶于1ml0.1N NaOH 溶液中，再加入1-3 滴5%醋酸鉛，加熱煮沸，溶液變?yōu)楹谏?br />（三）乳清中可凝固性蛋白質(zhì)的鑒定將制備酪蛋白時所得的濾液移入燒杯中，徐徐加熱。即出現(xiàn)蛋白質(zhì)沉淀。此為乳清中的球蛋白和清蛋白。注附：米倫反應是由于蛋白質(zhì)分子中有羥基苯基（-CH-OH）存在之故.一些在3.5 位置上沒有取代基的酚類化合物,例如*、酚及廱香酚也呈陽性反應。在蛋白質(zhì)分子中，只有*才具有羥基苯基，所以蛋白質(zhì)對米倫試劑起陽性反應。
1．樣品處理  精密稱取0.2～2.0g固體樣品或2～5g半固體樣品或吸取10～20ml液體樣品（約相當?shù)?0～40mg），移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中，加人0.2g硫酸銅、3g硫酸鉀及20ml硫酸，稍搖勻后于瓶口放一小漏斗，將瓶以45°角斜支于有小孔的石棉網(wǎng)上。小心加熱，待內(nèi)容物全部炭化，泡沫*停止后，加強火力，并保持瓶內(nèi)液體微沸，至液體呈藍綠色澄清透明后，再繼續(xù)加熱0.5h。取下放冷，小心加20ml水。放冷，移人100ml容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容置瓶中，再加水至刻度，混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸按同一方法做試劑空白試驗。
 2．按圖⒊1裝好定氮裝量，于水蒸氣發(fā)生瓶內(nèi)裝水至約2／3處，加甲基紅指示液數(shù)滴及數(shù)毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入數(shù)粒玻璃珠以防暴沸，用調(diào)壓器控制，加熱煮沸水蒸氣發(fā)生瓶內(nèi)的水。
3．向接收瓶內(nèi)加入10m1 2％硼酸溶液及混合指示液1滴，并使冷凝管的下端插人液面下，吸取10.0ml樣品消化稀釋液由小玻杯流入反應室，以10ml水洗滌小玻杯并使其流入反應室內(nèi)，塞緊小玻杯的棒狀玻塞。將10m1 40％氫氧化鈉溶液倒人小玻杯，提起玻塞使其緩緩流人反應室，立即將玻塞蓋緊，并加水于小玻杯以防漏氣。夾緊螺旋夾，開始蒸餾。蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內(nèi)，蒸餾5min。移動接收瓶，使冷凝管下端離開液面，再蒸餾1min，然后用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以0.05mol/L鹽酸標準溶液滴定至灰色或藍紫色為終點。
同時吸取10.0ml試劑空白消化液按3操作。
一、原理
蛋白質(zhì)分子中的肽鍵在堿性條件下能與二價銅離子作用生成紫紅色的絡合物，產(chǎn)生的顏色強度在一定范圍內(nèi)與蛋白質(zhì)的含量成正比，但雙縮脲反應并非蛋白質(zhì)*的顏色反應，分子中含二個以上肽鍵者有此反應。
二、雙縮脲試劑
未失結(jié)晶水的硫酸銅（CuSO4·5H2O）3.0g溶于500ml新鮮制備的蒸餾水或剛煮沸冷卻的去離子水中，加酒石酸鉀鈉（NaKC4O4O6·4H2O）9.0g，*5.0g，待*溶解后加入6mol/L NaOH溶液100ml，zui后加蒸餾水至1L，置聚乙烯瓶內(nèi)蓋緊保存。
酒石酸鉀鈉的作用是結(jié)合銅離子，維持銅離子在堿性溶液中的溶解度，*防止兩價銅離子還原。
三、正常參考范圍：60～80g/L
四、臨床意義
（一）血清總蛋白增高
1. 血液濃縮   嚴重腹瀉 、嘔吐、高燒。
2. 合成增加   主要見于球蛋白合成增加，多發(fā)性骨髓瘤。
（二）血清總蛋白降低
1. 血液稀釋   靜脈滴注過多低滲溶液，各種原因所引起的水鈉潴留。
2. 攝入不足和消耗增加   營養(yǎng)不良，慢性胃腸道疾病引起的消化吸收不良，消耗性疾病，結(jié)核病、甲亢、惡性腫瘤。
3. 合成障礙   嚴重腫瘤
4. 蛋白質(zhì)丟失   嚴重燒傷，大量血漿滲出，腎病綜合癥。熒光素標記銜接蛋白β抗體IgG