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上海雅吉生物科技發(fā)展公司

公司代理經(jīng)營進口品牌Amresco,sigma,R&D,IBL,RB,Santa cruz,wako,omega,ScienCell,ATCC等世界產(chǎn)品。主營產(chǎn)品ELISA試劑盒、金標試劑盒、放免試劑盒、細胞與細胞培養(yǎng)、血清、抗體抗原、生化試劑、各種酶類、分子生物學試劑盒、培養(yǎng)基、實驗室耗材、小型實驗室儀器等。

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人紅細胞生成素(EPO)免疫組化試劑盒

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  • 上海雅吉生物科技發(fā)展公司
  • 2016-09-29 00:32:58
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【簡單介紹】

人紅細胞生成素(EPO)免疫組化試劑盒,現(xiàn)貨供應,產(chǎn)品質(zhì)量可靠,在國內(nèi)外*,產(chǎn)品規(guī)格有50T和100T的,更多詳情請我公司,我們將竭誠為您服務。

【詳細說明】

人紅細胞生成素(EPO)免疫組化試劑盒,(更多資訊說明書價格等請詳情我公司)實驗步驟建議方案:
石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%
乙醇2 min;75%乙醇2min,自來水沖洗,ddH2O 洗2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書*方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫
度達到98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附1)* 注:有些抗原勿需修復,
直接進入第5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育30 min;
6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的*化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑Tween 20,37℃濕盒孵育封閉20 min;
12.加HRP-SA: 滴加用試劑C 稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20 nM),37
℃濕盒中孵育30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用DAB 溶液(試劑F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
人紅細胞生成素(EPO)免疫組化試劑盒,注意事項:
1. 修復后緩沖液須自然冷卻,自來水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導致
結(jié)晶或抗原封閉。
2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過的檸檬酸緩沖液不能反復使
用。
3. 若試劑為微量濃縮液,用前應低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。
4. 封片前一定要換用TBS 充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween 20,否則會
影響結(jié)果觀察。
5. 如須復染細胞核,則在封片前復染或直接采用含有染核試劑的封片劑進行封
,更多優(yōu)惠詳情:

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