293-T細(xì)胞培養(yǎng)

2012年06月14日 17:18:44人氣：2017來(lái)源：上海都宜生物科技有限公司

293-T細(xì)胞培養(yǎng) 應(yīng)注意以下幾個(gè)方面：

1.用1640加10%胎牛血清，有的種系用DMEM.血清要求質(zhì)量較高，在普通血清中細(xì)胞生長(zhǎng)不太好。1640用雙蒸水溶解，按說(shuō)明加入*。

2.培養(yǎng)液中應(yīng)加入HEPES，起緩沖pH值的作用，否則會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài)。如果用20%的HEPES，每次配培養(yǎng)液時(shí)每200ml培養(yǎng)液可加入5ml.加入HEPES后1640培養(yǎng)液顏色略呈橘黃色而非暗紅色。

3.消化所用*可選擇0.125%濃度，且不要消化時(shí)間太長(zhǎng)。也有研究者認(rèn)為不用*，直接吹打使細(xì)胞脫壁，但使用*效果較好。消化時(shí)在鏡下觀察到細(xì)胞形態(tài)稍有變化即可，不要等形態(tài)明顯變化后再停止?？梢圆挥眉友褰K止消化，只要將*倒出來(lái)，加上培養(yǎng)液吹打即可。

4.傳代密度不宜過(guò)高也不易過(guò)低，一般1瓶傳3瓶可能比較合適。

5.培養(yǎng)液應(yīng)該適當(dāng)偏酸性，在7.0-7.2之間比較好。一般加上HEPES后，pH值是不用調(diào)的。

6.細(xì)胞代數(shù)越高生長(zhǎng)越快，同時(shí)性狀和原代差別也更大。一般2-3天傳代一次比較合適。

7.傳代時(shí)細(xì)胞密度在80%左右比較好，如果超過(guò)90%融合再傳會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài)。

上一篇：金屬硬密封耐磨球閥的設(shè)計(jì)、制造與工藝

下一篇：安全閥與調(diào)節(jié)閥在使用中的區(qū)別

全年征稿/資訊合作 聯(lián)系郵箱：hbzhan@vip.qq.com

版權(quán)與免責(zé)聲明: 1、凡本網(wǎng)注明"來(lái)源：環(huán)保在線"的所有作品，版權(quán)均屬于環(huán)保在線，轉(zhuǎn)載請(qǐng)必須注明環(huán)保在線，http://www.niunang.cn。違反者本網(wǎng)將追究相關(guān)法律責(zé)任。; 2、企業(yè)發(fā)布的公司新聞、技術(shù)文章、資料下載等內(nèi)容，如涉及侵權(quán)、違規(guī)遭投訴的，一律由發(fā)布企業(yè)自行承擔(dān)責(zé)任，本網(wǎng)有權(quán)刪除內(nèi)容并追溯責(zé)任。; 3、本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其它來(lái)源的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)或證實(shí)其內(nèi)容的真實(shí)性，不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。; 4、如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。