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ZR-75-1乳腺癌細胞

參  考  價:面議
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廠商性質(zhì)代理商

所在地上海市

更新時間:2016-07-09 18:14:44瀏覽次數(shù):516次

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ZR-75-1乳腺癌細胞上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清,ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清,優(yōu)等胎牛血清,標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清,gibco特優(yōu)級胎牛血清血清,新生牛血清。
細胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體)ZR-75-1乳腺癌細胞
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時。
(3)調(diào)整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。

其他*產(chǎn)品:
Kainic Acid 紅藻氨酸, ** 487-79-6
HNE 4-羥基壬烯醛 75899-68-2
Guar GuM 瓜爾豆膠 9000-30-0
Guar hydroxypropyltriMoniuM chloride 瓜兒膠羥丙基*基氯化銨 65497-29-2
Gulonic acid 古龍酸 20246-53-1
GuM acacia 阿拉伯樹膠 9000/1/5
gusperiMus  84937-45-1
Guvacoline hydrobroMide  495-19-2
GW 4869  6823-69-4
Gw 842166x  666260-75-9
GW-1100 4-[5-[(2-乙氧基-5-嘧啶)甲基]-2-[[(4-氟苯基)甲基]硫代]-4-氧代-1(4H)-嘧啶]-苯甲酸乙酯 306974-70-9
GW-441756 1,3-二氫-3-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)亞甲基]-2H-吡咯并[3,2-B]吡啶-2-酮 504433-23-2
gyMneMic acid  1399-64-0
H-1152 Dihydrochloride  871543-07-6
H-1152 Glycyl Dihydrochloride  913844-45-8
H2TiF6 六氟鈦酸 17439-11-1
L-Alanine isopropyl ester hydrochloride DL-* 39825-33-7
H-ALA-PRO-OME HCL H-ALA-PRO-OME · HCL 71067-42-0
Halofuginone 常山酮 55837-20-2
Halofuginone hydrobroMide 氫溴酸鹵夫酮 64924-67-0
HALOPROGIN 氯丙炔碘 777-11-7
H-Arg(Pbf)-OH H-ARG(PBF)-OH 200115-86-2
細胞凍存
1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則  慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。

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